标本采集方法

一、  血液检验标本采集方法：

     血液检验标本分为全血、血浆和血清。全血标本主要用于临床血液学检查，如：血细胞计数和分类、形态学检查等。血浆标本多用于内分泌激素测定、血栓和止血检查。血清标本多用于临床化学和免疫学的检测。

按血液标本采集部位的不同，又可分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血，少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定需要用动脉血、毛细血管血主要用于各种微量检查法和大规模普查。

静脉血是最常用的实验室检查标本，真空采血法是最好的静脉血采集技术。基本原理是将双向针的一端在持针器的帮助下刺入静脉，有回血后将另一端插入真空试管内，血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭的状态下采血，避免了血液外溢引起的污染，并有利于标本的运输和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和检测用途，可根据需要选择相应的盛血试管。

（一）静脉血采集方法、注意事项和采集样品时所用材料的安全处置：

1、止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压迫静脉时间不宜超过40秒为宜，否则容易引起淤血、静脉扩张，并且影响某些指标的检查结果，如乳酸升高、pH值降低等。

2、采血时间和部位：大多数化验检查要求清晨、空腹。采集静脉血应尽量避免在输液的同时取血，输液不仅使血液稀释，而且对实验室检查结果产生严重干扰，特别是血糖和电解质。

3、避免溶血、杂质污染：采血器不许无菌、干燥、洁净，避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为红细胞的某些成分与血清（浆）不同，样本溶血可使红细胞的某些成分释放到血清（浆）中去，影响实验室的检查结果。

4、血样的采集：血样要求在每一天的同一时间采集，理想的时间是早晨7：00到8：00，尤其是监测为目的时，更要保证样本采集时间的统一。最后一次食物和液体应在前一天下午6：00到8：00（急诊检验例外）。血样采集应在不服药期间，如在早晨服药前。血样采集时，患者应仰卧位，采血点应在同一静脉区，通常为肘窝静脉。

5、标本采集后应立即送检，放置过久影响检验结果。当取血不顺利时，切忌在同一处反复穿刺，易导致标本溶血或有小凝块，影响检查结果。

6、采集血培养标本时应先注射厌氧瓶，尽量减少接触空气时间。

7、微量元素测定采集标本的注射器和容器不能含游离金属。

8、采集样品所用材料的安全处置：使用后的采血器、注射器针头等锐器应当直接放入不能刺穿的利器盒内或毁型器内进行安全处置，禁止对使用后的一次性针头复帽，禁止用手直接接触使用过的针头、刀片等锐器物；注射器针筒、棉签等其他医疗废物放入黄色医疗废物袋中，医疗废物和生活垃圾分类收集存放。消毒毁型后的医疗废物必须交给指定的医疗废物处理厂，不得擅自废弃。

（二）临床化学/免疫检验标本：

     临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本，最好使用真空负压采血管。标本采集主要注意：

1、化学项目大多数需空腹采集静脉血，多个单项化学检测项目组合检验时一般可采一管血。

2、采血量视检查项目的多少而异，通常2-5毫升。

3、多个组合检验项目同时采血时，应按下列顺序采集：

   血培养     无添加剂管    凝血管    有添加剂管

   有添加剂管的顺序为：

   枸橼酸盐管     肝素管    EDTA管    草酸盐管/氟化钠管

 4、不论是抗凝血还是非抗凝血，为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间，血液标本收集后，须尽可能早地将血清或血浆分离出来，避免影响检验结果准确性。从血液标本采集开始，必须在2小时内将全血处理为血清或血浆。

（1）血清（非抗凝血）：采血后标本于22～25℃（室温）15～30分钟后可自行完全凝固，禁用木棍和玻棍等剥离凝块；冷藏标本凝集较慢，加促凝剂者凝集加快。

（2）血浆（抗凝血）：应采用抗凝管采血，采血后标立即颠倒混合5～10次，采血后数分钟内可离心分离血浆。

（3）冷藏标本：通过抑制细胞代谢来稳定标本中温度依赖性的成分。标本于2～8℃冷藏。需要冷藏的标本有：儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、pH/血气、血氨、乳酸、丙酮酸等，全血标本一般不冷藏，血钾标本冷藏不得超过2小时，全血标本切忌冷冻。

（4）代谢抑制物和防腐剂的应用：用于抑制细胞代谢。血标本中加入氟化钠后，血细胞未分离情况下血标本中：血糖，22～25℃稳定24小时，2～8℃稳定48小时；氟化钠不适用于新生儿及儿童的血糖测定（因儿童红细胞压缩体积[pcv]高，细胞糖酵解难以控制）；氟化钠-麝香草酚混合剂不适用于酶学检测（因其抑制酶的活性）；甲醛草酸钾抗凝保存剂也不适用于血糖测定。

（三）红细胞沉降率（血沉，ESR）检测标本：

静脉采集枸橼酸钠（109mmol/L，即32.06 g/l）抗凝血(枸橼酸钠抗凝管采血,黑色盖帽的管子)。

采血注意事项:

1、单独采一管血: 管内已有0.4毫升的抗凝剂,采血正好到2毫升的刻度处(抗凝剂:全血=1:4)。

2、采血后立即倒置混匀5～10次。

3、采血后立即送检。

（四）血常规（全血细胞分析）检验标本：

    一般用 EDTA 1.5～2.2mg /ml抗凝(EDTA抗凝采血管,紫色盖帽的管子)。

采血注意事项:

1、采血后立即倒置混匀5～10次，不可用力震荡。

2、应按抗凝管刻度采血至2毫升，可不用空腹。

3、采血后立即送检（需显微镜观察学细胞形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过2小时学细胞的形态会发生改变）。

4、血型和血常规可只采一管血。

（五）75克葡萄糖耐量试验（OGTT）/ 胰岛素释放试验 / C肽释放试验：

1、病人准备：检查前三天每天碳水化合物量一般不低于250-300克。影响试验的药物（如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等）应停用三天，实验前一天晚餐后不再进食，空腹过夜（8-14小时）。

2、标本采集：

（1）次日晨空腹抽取血液2毫升，抗凝，测定血浆葡萄（即：空腹血糖，FPG）。

 （2）将75克无水葡萄糖溶于200-300毫升水中，5分钟内饮完。

 （4）口服葡萄糖后，准确于30分钟、1小时、2小时、3小时各抽取血液，算上空腹的，共5管血，分别测定葡萄糖。其中2小时葡萄糖水平是关键。

3、标本保存：采血后1小时内分离血清并及时放2～8℃冷藏保存。

4、注意事项：胰岛素测定受溶血影响较大，应避免溶血。

（六）高血压系列检验标本：

1、高血压三项：（肾素、血管紧张素I、II）：

（1）病人准备：β-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平，一般要在停药后2周测定肾素活性（PRA），利血平等代谢慢的药物应在停药3周测定。不宜停药的病人改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体PRA水平，故病人测定前3天应适量减少食盐摄入量，最好同时测定取血前24小时尿钠含量，以供分析PRA结果时参考。

（2）标本采集：静脉取血4～5毫升，拔除针头后缓慢注入到专用抗凝管中，盖好管塞后上下颠倒5次，混匀后2500转/分离心5～10分钟、分离血浆，将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检，需尽快冰冻保存（-15℃以下）。溶血标本不能检测。

（3）标本类型、标本量：专用抗凝管采血，分离血浆，取2毫升血

浆送检。

（4）标本保存：低温冰箱保存（-15℃以下），可保存2个月。

（5）注意事项：申请单上应注明抽血时的体位（卧位：病人在早上

6～8时起床前，取静脉血。立位：病人起床后活动3小时，取静脉血。）和饮食情况（普食饮食、低钠饮食）；标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。

2、醛固酮：

（1）病人准备：留样前应停服利尿剂至少3周，停服抗高血压药物1周。

（2）标本采集：血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝，采集后立即分离血浆，置-20℃保存待测；尿液标本要准确记录24小时尿量。

用10~15毫升浓盐酸防腐。

（3）申请单上注明：抽血时的体位（卧位、立位）和饮食情况（普食饮食、低钠饮食）；尿液标本要准确记录24小时尿量。

（七）皮质醇标本采集及注意事项：

       正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律，一般为早上8点或下午点采血，送检时务必在申请单上注明采血时间。

（八）流式细胞术检测项目的标本采集及注意事项：

1、淋巴细胞亚群系列：

标本要求：EDTA或肝素抗凝全血2毫升（推荐EDTA）。

注意事项：该系列项目在不同年龄段的细胞参考值不尽相同，所以送检时请务必在申请单上注明病人年龄。

2、白细胞免疫分型：

标本要求：肝素抗凝骨髓或全血2毫升。

注意事项：请使用白血病免疫分型专用申请单。

3、人类白细胞抗原B27检测（HLA-B27）/阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）检测：

标本要求：EDTA或肝素抗凝全血2毫升

注意事项：保证新鲜标本，流式细胞术检测项目需要24小时内送检。

（九）微量元素检测标本采集要求：

1、采血人员应戴乳胶或聚乙烯手套，若手套涂粉，需用静脉采血皮肤清洁法处理手套后进行操作。

2、橡皮塞对锌有污染，故普通采血管不可使用，请使用本中心提供的专用管。

3、采集方法：采静脉血0.5~1.0毫升，采集后马上轻轻颠倒混匀，粘上条形码，装入自封袋送检。

4、如不能及时送检，应放置2～8℃冷藏保存。

5、标本凝固或含凝块，不能检测。

（十）遗传学检测标本采集要求：

（1）标本采集：外周血标本可使用中心配送的肝素抗凝管（遗传专用）和采血针进行采集，采集后立即将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血；脐带血标本、骨髓标本可以在穿刺成功后，打开中心配送的肝素抗凝管盖，将脐带血或骨髓注入采集管中，立即

将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血，请注意无菌操作，不要污染管盖。请避免使用注射器采集标本后直接注入采集管的方式进行标本采集，以免引起溶血；请勿使用EDTA等抗凝管采集标本。

（2）标本量：外周血，脐带血、骨髓各4毫升。

（3）标本送检：合格标本须于采血后当天送至遗传实验室，故请于

标本采集后及时通知我中心工作人员接收标本；标本有溶血、凝血现象，也视为不合格标本。骨髓标本更应尽快送到实验室。

（4）标本保存：标本采集后置于18～25℃保存，不可冷冻，不可放置于高温环境中

（5）申请单填写：请完整填写申请单，尤其是标本采集时间、性别、

病史、临床诊断等。

（十一）基因检测标本采集要求：

1、所有用于基因检测的标本必须用无菌试管或容器留取，严禁使用肝素抗凝管，采集标本时注意无菌操作。

2、为避免污染，送检基因诊断标本项目需要单人、单项目、单管。

3、采集方法：

（1）血液标本：抽取病人静脉血，置无菌试管中，室温自然凝固或2000转/分离心，取分离出的EDTA抗凝血浆/血清送检。

（2）女性分泌物标本：

①分泌物标本采样应在非月经期进行；采样前3天内不使用阴道内药物，不冲洗阴道；24小时内不应有性行为。

②采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去，更换棉拭子，将棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处，旋转3～5周，以保证取得较多的柱状上皮标本，对于怀疑HPV感染的患者，尽量采集病变部位标本，可提高HPV的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖。

（3）男性分泌物标本：

先清洁尿道口，将棉拭子伸入男性尿道1厘米，旋转3～5次获得标本，将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖。

（4）疣体标本：

对于生殖器或肛周有疣状体增生，怀疑为尖锐湿疣者，宜直接采集疣体组织置于标本管中送检。

备注：疣体标本时，需要在申请单上的标本类型栏内写明“疣体”。

4、标本保存：检测靶核酸为DNA的标本，可在2～8℃保存3天；检测检测靶核酸为RNA的标本，应在-20℃以下保存。

（十二）骨髓检查的要求和注意事项：

1、涂片要求：二张血片，六张骨髓片，怀疑白血病则需8张骨髓片。骨髓血片注明“B”，骨髓片注明“M”以示区别。

2、申请单注意事项：

（1）病历摘要：应填写全面，尤其是肝、脾、淋巴结、出血状况等与血液病相关的症状以及药物的应用等，均应填写清楚。

（2）化验结果：血常规结果一定不能缺，如可能，MCV、MCH、MCHC及分类也要填上。

（3）采取骨髓的部位也要填上。如采取骨髓不顺利，应重抽，以免耽误病人诊断。

（4）写上主治医生联系方式，如科室电话、手机号码等（以方便随时以临床取得联系）。

二、尿液常规检验标本采集方法：

（一）尿标本种类：

按检验目的，常可采用下列标本：

1、晨尿：最好。安静状态下留取清晨第一次尿，该标本为浓缩尿，其细胞和管型等形态完整，适合做各种有形成分的检查和尿蛋白、尿糖等项目的测定。

2、随机尿：较常用，适用于门诊和急诊的病人常规检验，但结果易受多种原因影响。

3、空腹或餐后尿：适用于糖尿病、尿胆原、尿蛋白等的检查。

4、24小时尿：用于尿液成分定量分析。

（1）24小时尿采集方法：留尿当日早晨8点，将膀胱中的尿液排空，弃去不要。之后的每次排尿均收集于一干净的大容器内。至次日早晨8点最后一次尿液共24小时之间的所有尿液全部收集于大容器内。在收集期内，每次尿液标本均应放冰箱2～8℃或阴凉处保存。全部收集完毕测量并记录24小时总尿量，混匀后取20～30毫升置于有盖容器内送检。

（2）24小时尿可用于Cr、BUN、K、Na、Cl、Ca、P、UPR、UAER等的检测。

5、特殊实验尿（如3小时、8小时、12小时等计时尿和餐后尿等）：则应按医嘱要求进行留尿，并注明用药时间，便于分析比对。

6、清洁尿（中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿）：用于病原微生物培养、鉴定和药敏试验。

（二）尿液标本收集容器要求：

1、清洁、干燥、有盖、便于标记和转送、一次性使用，有较大开口便于收集。

2、避免阴道分泌物、精液、粪便等污染，还应注意避免烟灰、纸屑等异物混入。

3、无干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入，不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿收集标本。

4、能收集足够尿液，最好大于50毫升，如收集定量尿，容器应足够大，并加盖，必要时加防腐剂。

5、如需培养应在无菌条件下，用无菌容器收集中段尿。

（三）尿液采集方法及注意事项：

     尿液常规检查标本应按照下列原则进行采集：

1、尿液标本必须新鲜，并要及时检查，否则生长细菌，使其中的化学成分发生变化。清晨第一次尿最理想，因其较浓缩、条件恒定，便于对比。门、急诊患者也可随机取尿。在留取24小时尿或2小时尿时，尿液标本应该在冰箱保存，也可根据检测目的选择性加入防腐剂。

2、尿液采集方法多采用自然排尿法，需要注意异物污染。对自然排尿困难或需细菌培养者，可在无菌操作下用导尿法或膀胱穿刺法采集。

3、尿中某些化学物质及有形成分不稳定，一经排出后易发生物理、化学变化；而尿中原有或污染的细菌生长也可导致成分改变，如葡萄糖分解。因此，采集的尿应加盖后尽快送检，在采集2小时内完成有关检查。

4、如不能及时送检，或收集较长时段尿样，可采取化学防腐（不能用于微生物检查）、冷藏等保存措施；尿液标本在冰箱可保存6～8小时，但细菌等有形成分会有破坏，并会有结晶析出。

5、根据不同检测目的选择不同防腐剂，临床使用较多的防腐剂有：

（1）甲醛（formalin），用于尿液有形成分检查，浓度为400mg/L尿液，既40%。

（2）甲苯（toluene），常用于尿糖和尿蛋白等化学成分的定性和定量检查，浓度为5～20毫升/L尿液。

（3）浓盐酸（hydrochloric acid）：常用于定量测定尿醛固酮、儿茶酚胺等，浓度为1毫升/L尿液。

6、尿沉渣检查：清晨空腹第一次尿，应在1小时内送检。标本置于干燥、干净的容器内，至少10毫升。一般情况下，有患者自己采集中段尿。女性患者应清洗外阴部后留尿。

7、特殊试验外，晨尿和随机尿都要中段尿，女性在经期不做尿液检查。